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  • 1. 现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质,利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性,并比较二者毒性的强弱,请完成下列实验报告。

    1. (1) 实验材料:小白鼠胚胎。

      药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。

      实验原理:,根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。

    2. (2) 实验步骤:

      Ⅰ制备细胞悬液:把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬液。

      Ⅱ进行细胞培养:

      ①取A、B、C三个洁净的培养瓶,

      Ⅲ制作临时装片:

      ①当细胞繁殖到第8代左右时,同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞从瓶壁上脱落,再加入动物细胞固定液迅速固定细胞,将细胞固定在不同的分裂时期。

      ②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央,加1~2滴一定浓度的染色,3~5 min后,盖上盖玻片,制成临时装片。

      Ⅳ镜检和统计:把临时装片放在显微镜下,寻找处于期的细胞,并与对比以确认发生上述变异的细胞,同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数(Q值)。

    3. (3) 实验结果:

      培养瓶

      A

      B

      C

      Q

      1.3%

      12.5%

      0.1%

      实验结论:

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