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  • 1. (2020高二下·西城期末) 禾谷镰刀菌可侵染小麦等作物,使其产量和品质下降。研究者通过构建融合基因 Ve-FG 并转化拟南芥,以期实现转基因植物抗禾谷镰刀菌的目的。

    1. (1) 利用 PCR 技术,将野生番茄的抗黄萎病基因 Ve 与禾谷镰刀菌的识别基因 FG 进行重组,构建融合基因 Ve-FG(如图 1)。

      ① 设计 3 对引物。其中引物 2 的一部分序列与 C 片段一部分序列互补,另一部分序列与片段一部分序列互补。

      ② 通过 PCR 分别克隆A、C、P 片段。克隆 A 片段应选用的引物是

      ③ 以 A、C、P 片段为进行延伸,将 A、P、C 片段拼接,再以引物 1、4 进行 PCR,扩增融合基因 Ve-FG。

    2. (2) 用将 Ve-FG 与质粒连接,构建重组质粒(如图 2,图中潮霉素抗性基因只在植物细胞中表达)。将农杆菌与重组质粒混合,一段时间后涂布到含有的平板培养基上进行筛选。用含重组质粒的农杆菌转化拟南芥,几周后收获种子,种在含有潮霉素的培养基上,获得转基因拟南芥株系 1 和株系 2。
    3. (3) 分别提取株系 1 和 2、非转基因拟南芥植株叶片中的 DNA 作为模板,PCR 扩增 Ve-FG 基因后进行电泳,结果如图 3。

      ① 电泳时应以为阳性对照。

      ② 成功导入 Ve-FG 基因的是

      ③ 株系 1 可抗潮霉素,但电泳结果无阳性条带,原因可能是

    4. (4) 为检验融合基因 Ve-FG 的功能,以导入 Ve-FG 基因的植株为实验组,导入空白质粒的植株为对照组,分别接种。一段时间后观察发现,与对照植株相比,实验组整体长势更旺盛,叶片萎蔫程度、叶片变黄程度也较轻,这表明

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